Datorită dimensiunilor și frumuseții lăcașului de cult, cât și acusticii deosebite, aici au loc concerte de muzică religioasă, de regulă, înaintea sărbătorilor mari – Sfintele Paști și Crăciun –, dar și cu alte prilejuri aniversare sau comemorative. Printre corurile care au concertat aici se numără: Corala Nicolae Lungu a Catedralei Patriarhale, Corala Bărbătească Ortodoxă Te Deum Laudamus, Corala Gloria Crucis a bisericii Sfântul Spiridon-Nou, Corul Regal, Grupul Psaltic al maicilor de la Mănăstirea Diaconești, Grupul Psaltic Nectarie Protopsaltul și Grupul Psaltic Tronos al Catedralei Patriarhale. Aceste evenimente sunt pentru participanți nu doar un prilej de a asculta muzică de calitate, ci și de a admira arhitectura impozantă a bisericii și faimoasa pictură a lui Gheorghe Tattarescu. După mărturia unora dintre ei, succesul concertelor se datorează tocmai atmosferei plăcute pe care lăcașul de cult o emană, făcând din biserica Sfântul Spiridon-Nou locul un loc mai potrivit pentru astfel de manifestări. În cadrul unora dintre concertele religioase organizate aici, s-au realizat strângeri de fonduri în scopul sprijinirii unor cazuri sociale sau umanitare.